產品型號：MCP-1/CCL2/MCAF

廠商性質：生產廠家

所在地：上海市

更新時間：2016-05-31

產品簡介：

 一、服務

      我們可以根據您的應用需要，比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測試劑盒，有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。

二、兔子單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒檢測概述

      ELISA（酶聯接免疫吸附反應分析）是以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的實驗技術。 由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩定性。

      實際應用中，通過不同的設計，具體的方法步驟可有多種。即：用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。目前我們對客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務。

三、兔子單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒技術流程

雙抗體夾心法(檢測未知抗原) 間接法(檢測未知抗體)

1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml，4℃ guoye。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次。

2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。

3、加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。

4、加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

5、終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml

6、結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。 1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml， 每孔加0.1ml，4℃guoye。次日洗滌3次。

2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)

3、加酶標抗體：于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。

4、加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

5、終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml

6、結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

四、ELISA試劑盒的性能：
準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值，大于等于0.9900。
靈敏度：zui低檢測濃度小于10 pg/ml。
特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
重復性：板內、板間變異系數均小于15%。

五、ELISA試劑盒的優點體現：
·特異性高：進行了廣泛的非特異性排查，避免了由于交叉反應和干擾導致的實驗數據誤差。 
·精 度 高：通過加標回收率和線性稀釋實驗，確保樣本值的準確性，精確度高于同類產品（較低的CV%）。 
·重復性好：lot-to-lot檢測確保zui小的批間差異。 
·可靠性強：經優化的試劑盒組分可有效的zuzhi假陽性和假陰性試驗結果。 
·標準曲線：在保證精準數據的前提下提供較寬的檢測范圍，以滿足需求。 
·價格低廉：*RD試劑，國內分裝配置，大大減少了客戶因為價格高而必須購買國產試劑盒的顧慮。

六、ELISA試劑盒實驗操作的常見問題：
1. 問--客戶用48T試劑盒，大概只有十個樣所以他一次用不完那么多板條，但是他想做兩次，可封板膜只有一張，那如果用完了怎么辦？可以用什么別的東西取代嗎？
答--可以把封板膜剪掉，用多少剪多少也可以用封口膜替代。
2. 問--實驗過程中溫育是放在哪溫育呢？
答--可以在水浴箱、細胞培養箱和烘干箱里面都行，只要恒定溫度為37度。

七、ELISA試劑盒的必知項：
1. 水溶性、低黏度、無腐蝕、不易燃、*。
2. 所采用的方法特異性好，靈敏度、準確度、精密度。
3. 所用標準品或標準參考物符合推薦標準和要求。
4. 貯存期至少為1年。

八、兔子單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒洗板方法
1.  手工洗板方法：吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內，浸泡1-2分鐘，根據需要，重復此過程數次。
2.  自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
特異性
    本試劑盒可同時檢測重組或天然的人C3，且與其它相關蛋白無交叉反應。